防止细胞老化主要还是要做到勤观察、勤换液、勤传代、勤保种,特别是传代,不能等细胞太密了之后传,般细胞建议长到70%融合度传代完好;换培养液应该根据自己细胞消耗培养基的情况来确定是否该换。
选择正确的血清与培养基:细胞对血清特别敏感,直接影响细胞的生长。定要选择适合的血清不然就会因营养物质不协调而导致细胞老化;在间充质干细胞培养时必然要进行消化,但是消化对细胞的表面蛋白质有很强的破坏作用,因此不能长时间进行消化并且在选择消化酶时也要选择较为合适的pH和浓度,不然就会使细胞老化或者分化。
在进行细胞培养时,我们经常会听到些业名词,原代培养是什么?什么是世代数?细胞系是什么?有限细胞系又代表的是什么?有的有名词搞不清楚的话,会对细胞培养过程也会有定的影响。根据老师们的反馈,我们总结了以下容易混淆的概念供大家参考~
1、原代培养(Primary culture)
开始于直接取自生物体的细胞、组织或器官的培养称为原代培养。通常代表异质细胞群,很难标准化和繁殖。它们的寿命般有限,而且已知它们会随着时间而改变其差异特征。
2、传代(Passage(Subculture))
细胞从个皿里转移或传代到另皿里的过程称为细胞传代。这是个操作行为,无法准确定义细胞分裂次数。
3、传代次数(Passage number)
种细胞被传代培养的次数称为传代次数。
4、世代数(Generation number)
种细胞所经历的细胞数量倍增次数称为世代数。
5、群体倍增时间(Population doubling time)
在对数生长期中期细胞数量翻倍所需要的时间间隔称为群体倍增时间。
6、群体倍增次数(Population doubling)
在培养过程中细胞所经历的细胞数量倍增次数称为群体倍增次数。
7、细胞系(Cell line)
原代细胞经过第①次传代后增殖的细胞称为细胞系或亚克隆。随着细胞的传代,生长能力强的细胞会占据优势,导致细胞群体在基因型和表现型上达到定程度的均性。
8、细胞株(Cell strain)
细胞系通过选择或克隆获得的具有特征的细胞系称为细胞株。与亲代细胞系起始时相比,细胞株往往会获得其他些遗传学改变。
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