细胞冻存液配方:
用于冷冻保存细胞的培养基应始终与用于通过添加胎牛血清(FBS)(无血清培养物的情况下)或FBS浓度增加来繁殖细胞的制剂相同,但是最终浓度不超过20%。
如果在冷冻或解冻过程中裂解一些细胞,FBS将倾向于结合可能释放的有毒物质。还必须使用细胞冻存液。
可以使用两个(2)中的任何一个。主要选择是无菌二甲基亚砜(DMSO),终浓度为7%-10%,在大多数情况下10%是最佳的。
另一种选择是无菌甘油,在培养基中终浓度为10%。如果冷冻保存的细胞类型可能因暴露于强双极化合物如DMSO而受到不利或不良影响,则应使用甘油。
其实例是HL-60细胞,其在暴露于DMSO时可以分化。
如果这将引起关注或可能对随后的培养产生负面影响,甘油将是优选的细胞冻存液。
重要提示:细胞冻存液,尤其是DMSO,每次都必须新鲜使用。
不要购买大量产品并继续打开和关闭试剂瓶。两种细胞冻存液都会从空气中快速氧化/或吸收潜在有毒物质。
冷冻保存培养基每次应仅以当天所需的体积制成。
它可以在+ 4°C保持长达一周,通常没有问题。然而,非常敏感的培养物,特别是在无血清培养基中繁殖的培养物可能需要非常新鲜、纯净的冷冻保存培养基。
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