我们使用FBS形式的Gibco来培养我们的结肠癌细胞系(HCT-116,COLO-205,HT-29和SW-620)它没关系,具有良好的形态学外观,如数据库中,我进行了亚培养每2-3天一次。但是最近我们开始使用另一家公司的FBS,但我们意识到细胞的生长非常低,我们每8-10天对它们进行传代培养,甚至形态形态也发生了变化。那么FBS(胎牛血清)的变化会影响细胞的质量吗?
你可能一开始没有看到新FBS的影响 - 细胞可以拥有可用于初始生长的细胞内储存(这是我测试~2周的原因之一 - 允许他们生长的FBS以前穿的虽然说实话,这应该会在几天内消失)。
除非细胞受到压力(例如低密度电镀或在毒素存在下电镀等),否则您甚至可能看不到任何影响。当受到压力时,细胞可能依赖于FBS中的因子(例如生长因子)来保持活力/分裂,这可能在“新”FBS中不存在/降低
。
当我进行FBS测试时,我故意以推荐的最低“分裂”水平培养细胞(即如果细胞产品表说接种1x10e5-3x10e5之间的新培养物,我将分裂到最低水平 - 这是我长大的第二个原因2周,每次分裂时重新设定所有培养物中的细胞密度)。这有助于突出FBS批次之间的差异。
对于某些细胞,一些FBS类型也会更好。您可能会发现来自“供应商X”的FBS比“供应商Y”中的FBS更好地支持Jurkat细胞的增长,但您的HeLa细胞在FBS中从“供应商Y”可能比从“供应商”X中的FBS更好(如果那讲得通?)。事实上,当我用上面提到的那些线测试Gibco和ATCC FBS时,我注意到了这种效应(尽管它的效果很小,而且一般来说质量好的FBS可以很好地支持大多数细胞类型)。
如果你不能回到你原来的FBS供应商那么你可以尝试通过在你的新FBS中培养它们来“血清适应”你的细胞 - 如果它们不死,它们最终可能会增加生长速度/生存力。细胞适应新的条件。
然而,这种“选择性压力”可能导致细胞丧失或获得一些表型功能(培养中的所有细胞都处于一定程度的选择压力下,这就是为什么我们制造细胞工作区并且不会过度通过它们,因为它们最终会改变(表型漂移))。
沪公网安备 31011402008568号
沪ICP备18030131号-1