怎样才能避免3T3L1前脂肪细胞分化过程中的细胞漂浮？

Q:在做3T3L1前脂肪细胞分化过程中，当加了IBMX(0.5mM)+胰岛素(10ug/ml)+地塞米松(0.25uM/L)后，细胞分化的比较好，

在加分化液后的第4天就开始出现脂滴，在第8天后有90%以上的细胞中出现明显的脂滴，

但是从加分化液后的第2天起，培养液中就开始出现大量的悬浮细胞，每次换液时这些悬浮的细胞就丢失了，

到第8天后培养瓶中贴壁的细胞很少啦，如何才能避免这些细胞的悬浮啊！是所加分化液浓度问题（如胰岛素浓度）还是其它原因啊？

A:细胞的来源一定要好。3T3L1细胞株容易蜕化，一旦发现细胞的形态不好一定要换新的细胞株，

最好一年从atcc购买至少一次，细胞的好坏是决定后面，分化、漂浮等等一切的关键，本人的细胞都是从atcc购买。

1：8传代后三天即可长到80%以再次传代，传代后4天细胞可以融合，再让其融合两天后即可以分化，时间过久细胞会漂浮或层叠

，不利于分化；没有融合的过程，细胞没有退出快速生长期也不利于分化；分化之前可以将细胞用hank‘s液轻轻洗一下，洗去漂浮的细胞，

然后再加分化液；已经开始分化的细胞每次换液时候小心，不要去振荡或摇晃瓶子，可以将瓶子竖立起来，将培养液加在瓶子上没有贴细胞的一面，

这样不会将细胞吹打起来；细胞分化过程中换液要及时，按两天一次换液，分化后第8天有90%以上的细胞中有脂滴，要及时使用，

不然时间稍长分化好的细胞就漂浮起来啦！再想让它贴壁就困难啦！