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RAW264.7细胞状态不好,是培养基的问题吗?

Q:RAW264.7细胞用的是DMEM高糖培养基,培养的细胞不是很好,是培养基的问题吗?

该细胞我用的是DMEM高糖培养基,10%FBS,1%P/S。培养情况不是很好,细胞膜向外生出很多角,希望培养过此细胞的人可以一起交流。另外,此细胞贴壁很紧,不知各位用胰酶消化几分钟?

 

A:RAW264.7细胞为小鼠单核巨噬细胞白血病细胞
培养基:90% DMEM  +10% FBS
消化条件: 预冷PBS浸泡5-10Min
细胞正常形态为圆形,贴壁生长,生长速度较快,细胞难消化,消化时用预冷的PBS淋洗,然后浸泡5min,让后用枪轻轻吹起吹散收集离心,这个过程很关键,如果没有消化到位就吹打或消化过久,细胞次日贴壁就会分化,分化之后的形态是细胞两端长出尖尖的触角,细胞不再圆形贴壁,而是平铺向四周扩散生长。
所以你换培养基试试看,我养的挺好的!

RAW264.7细胞

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