Q:细胞增殖实验(细胞毒性实验)中,
细胞铺板数量是以什么为标准来定?之前感觉是以检测当日细胞覆盖96孔孔底80~100%为宜。现在似乎感觉有点问题。迷茫中……贴壁细胞是绝对不能超过1万个每孔吗?有的细胞个头特别的小,铺下去72小时候后看着很少。还有些细胞特别的慢,72小时候也是很少。我用Alarm blue方法检测,经常 无药的空白对照孔的荧光强度比给药(低浓度)的还要低。而且中间还经常跳动,有的超出趋势(按照趋势应该有的强度)的高或者低。
A:消化每瓶细胞,如重悬体积为8ml,你可以计数每ml的量,假如5*10^5个/ml,那么一瓶就是4*10^6个细胞,铺96孔板时就可以换算成长满一个孔的量,即4*10^6/25(瓶子底面积)*0.32(96孔板每孔面积),做MTT实验需要72h,再按照倍增时间,如24h,再换算成你种板时候的量,要除以2^3。不知道这样表述明白了么
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