关于血清的小知识
血清的颜色为什么不一样?
血清中为何会有沉淀?
如何除去血清中的沉淀?
血清如何存储和解冻?
收到血清时需要做的
1. 验收
查看血清包装是否完好,是否有漏液破损情况,如有破损需售后处理。
2. 血清有部分融化了,该怎么办?
运输过程中干冰挥发,可能导致血清部分融化,此时让血清完全解冻,轻轻摇动血清瓶,然后重新冻结血清,血清的质量不会受到影响。
怎么解冻血清
1. 将冻存的血清移到 2-8℃ 的冰箱中,过夜处理;
2. 将血清移至 37℃ 水浴中,间歇性摇晃混匀底部的溶解物,直至全部溶解。
注意:
① 温和的升温过程可有效减少沉淀的产生,不推荐直接高温解冻血清;
② 解冻之后的血清不要长时间放置在 37℃ 下;
③ 若血清没有混匀且放置于高于 40℃ 的水浴中,底部的蛋白会变性形成沉淀;
④ 在解冻过程中,需不断的摇晃混合以阻止形成梯度及沉淀;
⑤ 在解冻或长时间储存之后,血清中会出现浑浊物和絮状物;
⑥ 反复冻融会造成血清的沉淀增多,给后续处理带来麻烦,我们建议血清的解冻/冻存次数越少越好。
血清的颜色为什么不一样
胎牛血清颜色是由血红蛋白(鲜红)和胆红素(黄)决定的,主要是受血红蛋白影响。血红蛋白含量很低时,含少量胆红素,呈淡黄或金黄,血红蛋白含量高时,会呈现淡红色。
血清的颜色取决于血红蛋白浓度,不同批次的血清血红蛋白含量不一样,该参数的变化不会影响血清性能。
为什么血清里边有沉淀物
血清中沉淀主要有:纤维蛋白(絮状沉淀),胎球蛋白,脂蛋白,冷凝集素,玻连蛋白,磷酸钙(显微镜下小黑点沉淀),胆固醇等。
1.造成沉淀的主要原因
血清热灭活;
37℃ 孵育;
频繁的解冻与冻存操作;
解冻过程中未混合;
经 γ-辐照;
2-8℃ 长时间储存;
在自动解冻的冰箱中储存。
少量的沉淀是血清解冻过程中的正常现象,过于澄清的血清并不代表更高的品质,也可能是「预老化」(加工过程中反复冻融尽可能的去除纤维蛋白原)的结果。虽然血清中的沉淀很难预测和阻止,但合理正确的储存和使用方法可以降低血清中沉淀的析出,同时也可采取简单的方式去除沉淀物。
2. 去除沉淀的方法
如果血清中含有大量的沉淀,我们不建议直接过滤血清。若去除这些絮状沉淀物,可将血清分装至无菌离心管中,以 400 g 稍微离心,上清液直接加入培养基内一起过滤。
血清是否需要热灭活
如果培养的细胞用于免疫学试验;培养ES细胞、平滑肌细胞时,推荐使用热灭活血清。
如有灭活血清的需要,可在56ºC的水浴中进行30分钟的血清热灭活,或选购经热灭活处理的胎牛血清。
血清的储存方法及注意事项
建议将血清储存在 -20℃ 条件下。
血清虽然可以在-80°C下储存,但是我们不建议在该条件下储存,一是在-80°C条件下存储有包装瓶破裂的风险,另一方面解冻时巨大的温度变化会导致产生更多的沉淀。
血清一旦解冻,可在2-8℃ 条件下储存 6 周。如果解冻之后的血清储存时间需要大于 6 周,建议分装成合适的体积并重新冻存。
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